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  • Agarosix MC90 IMAC親和層析填料

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      Agarosix MC90 IMAC填料是金屬親和層析填料,適用于純化組氨酸(His)標(biāo)簽的重組蛋白,這類重組蛋白廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。該填料以瓊脂糖為基質(zhì),粒徑為90 μm, Agarosix MC90-Ni Excel為TED類型的Ni親和層析填料,不用重復(fù)上Ni; Agarosix MC90-NTA Ni為NTA類型親和填料,具有更高載量。瓊脂糖基質(zhì)的親和層析填料具有良好的生物相容性,避免了與生物類樣品的非特異性吸附。瓊脂糖表面專有連接物鏈接了能螯合多價(jià)金屬離子的羧酸基團(tuán)。

    介質(zhì)特性:

    • Agarosix MC90-Ni Excel 為TED螯合,耐受EDTA,不用重復(fù)上 Ni,減少工藝操作流程,提高生產(chǎn)效率。
    • 高載量,滿足生產(chǎn)所需,Agarosix MC90-NTA Ni載量可達(dá)50mg/mL。
    • Agarosix MC90-Ni Excel具有良好EDTA耐受能力。
    • 耐堿性良好,使用壽命長(zhǎng)。
    • 鎳離子脫落非常低,避免引入金屬離子雜質(zhì)。
    技術(shù)參數(shù)
    填料類型 Agarosix MC90-NTA Ni Agarosix MC90-Ni Excel
    基質(zhì) 高交聯(lián)6%瓊脂糖 高交聯(lián)6%瓊脂糖
    粒徑 90 μm 90 μm
    pH 穩(wěn)定性(操作)
    pH穩(wěn)定性(CIP)
    3~12
    2~14
    2~12
    2~14
    螯合比例 4 : 2 5 : 1
    His-tag Protein載量 ≥ 50 mg/mL ≥ 35 mg/mL
    操作溫度 2~40℃ 2~40℃
    操作壓力 1100 cm/hr,柱高:200 mm, 壓力 1.5 bar(0.5 M NaCl)
    流動(dòng)相兼容性 水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物、常用緩沖液 耐受100mM EDTA(2h)、10mM EDTA(24h)、10mM DTT
    Ni補(bǔ)充頻率 Ni易脫落,一般3-5次需重新補(bǔ)Ni 不用重復(fù)上Ni
    清洗(CIP) 0.1 M NaOH 0.5 M NaOH
    再生條件 含0.1-1 M咪唑的緩沖溶液
    儲(chǔ)存 4-35°C,50% (v/v) ,保存于20%乙醇中

    性能測(cè)試

     

    圖1.Agarosix MC90-Ni Excel壓力-流速測(cè)試

    常規(guī)線速度下(200-400cm/h),在幾種常見(jiàn)流動(dòng)相中填料壓力表現(xiàn)良好,低于1 bar;建議裝柱高度20-25 cm。

     

    圖2.Agarosix MC90-Ni Excel親和填料EDTA耐受實(shí)驗(yàn)

    Column:Agarosix MC90-Ni Excel、競(jìng)品Ni Excel

    Mobile Phase: A: 50mM PB,500mM NaCl,pH8.0; B: 25M PB,500mM 咪性,pH8.0

    測(cè)試樣品:His-tag Protein

    在100 mM EDTA條件下泡堿1 h, Agarosix MC90-Ni Excel DBC下降至67.98%,競(jìng)品Ni Excel下降至42.06%;

    在EDTA耐受性方面,Agarosix MC90-Ni Excel具有更高的耐受性。

     

    圖3.Agarosix MC90-Ni Excel與競(jìng)品耐堿性測(cè)試DBC變化

    耐堿測(cè)試實(shí)驗(yàn)條件

    泡堿濃度:1 M NaOH溶液

    Column:Agarosix MC90-Ni Excel、競(jìng)品Ni Excel

    泡堿測(cè)試模擬填料壽命實(shí)驗(yàn),一般CIP條件0.5 M堿洗5-6CV,約30min。泡堿48h相當(dāng)于96次純化實(shí)驗(yàn)CIP,Agarosix MC90-Ni Excel與競(jìng)品保持在初始載量的80%左右,整體耐堿性能與競(jìng)品相當(dāng)。

    應(yīng)用圖譜

    產(chǎn)品名稱 粒徑 訂貨號(hào)
    Agarosix MC90-Ni Excel 90 251590990
    Agarosix MC90-CA Excel 90 252390990
    Agarosix MC90-NTA Ni 90 251390990
    Agarosix MC90-NTA CA 90 252290990

    預(yù)裝柱規(guī)格為4.2 、5 mL,包裝規(guī)格為1L、5 L 、10 L、50 L。

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