Proteomix

• 單分散型填料顆粒
• 寬的pH范圍: 2-12
• 優(yōu)異的分離效率、選擇性和分離能力
• 耐受高壓：10、5、 3 &1.7 μm分別可以耐受4000, 6000, 8000 & 12000 psi
• 對不同生物物種的差異性分析具有高的分辨率
• 1.7 & 3 μm粒徑的填料最適合用于蛋白質(zhì)組學中的全蛋白分離和分析
• 適合多肽、碳水化合物、多糖、蛋白質(zhì)、多聚核苷酸、細胞裂解液和多維色譜分離

　　Proteomix離子交換樹脂采用了賽分公司獨創(chuàng)的合成技術(shù)，所得到的無孔樹脂具有高的離子交換容量。填料為剛性、球形、高交聯(lián)度的聚苯乙烯/二乙烯苯(PS/DVB)顆粒。無孔填料的粒徑有1、1.8、3、5和10 μm等幾種規(guī)格。PS/DVB樹脂表面鍵合有一層高度親水的納米厚度的中性聚合物薄膜。疏水的PS/DVB樹脂表面完全被這種親水材料覆蓋，從而消除了PS/DVB對生物分子的不可逆吸附，保證了其具有很高的分離效率和生物樣品回收率。運用賽分獨有的化學鍵合技術(shù)，可將離子交換官能基團致密均勻地鍵合在親水層的表面，獲得高容量的離子交換層。無孔Proteomix離子交換樹脂的獨特之處在于它綜合了高容量和無孔樹脂所固有的高分離效率兩個優(yōu)點。Proteomix離子交換樹脂可用于蛋白、寡核苷酸、多肽、聚多糖、細胞溶解液、納米顆粒和納米管等的分離。

Proteomix SCX、WCX、SAX和WAX填料的化學組成

　　離子交換固定相有強陽離子交換（SCX）、弱陽離子交換（WCX）、強陰離子交換（SAX）、弱陰離子交換（WAX）四種。Proteomix SCX、WCX、SAX、WAX相分別是將磺酸基、羧基、季銨基和叔胺基化學鍵合在無孔PS/DVB樹脂親水涂層表面而形成的。

高的吸附容量

　　眾所周知，無孔樹脂具有最大傳質(zhì)和最小橫向擴散的優(yōu)點，因此可使樣品得到快速、高效的分離。但是，由于無孔樹脂的比表面積低，這就導致了它的分離容量不高，從而限制了其在實踐中的許多應用。賽分科技所開發(fā)的合成技術(shù)使Proteomix離子交換樹脂在提高無孔樹脂交換容量方面取得了創(chuàng)新性突破。該技術(shù)可以使無孔樹脂的吸附容量達到與有孔樹脂相當?shù)乃?。從圖1中可以看到，3 µm粒徑的Proteomix SAX和WAX無孔離子交換樹脂的動態(tài)吸附載量分別為35和26 mg/mL。圖2顯示3 µm粒徑的Proteomix SCX無孔樹脂的動態(tài)吸附載量可高達53.5 mg/mL。

圖1. Proteomix陰離子交換樹脂(3 µm)動態(tài)吸附載量測試

流動相: 10 mM Tris/HCl, pH 8.0

流速: 0.25 mL/min

檢測波長: 280 nm

樣品: 3 mg/mL BSA

圖2. Proteomix陽離子交換樹脂(3 µm) 動態(tài)吸附載量測試

流動相: 10 mM Tris/HCl, pH 8.0

流速: 0.25 mL/min

檢測波長: 280 nm

樣品: 3 mg/mL溶菌酶

圖3. 細胞色素C（20 mg/mL）的吸附容量測試圖譜

流動相: A, 20 mM PBS; B, A+1.0 M NaCl

梯度: 0-70% B (21 min)

流速: 0.35 mL/min

壓力: 2,800 psi

檢測波長: 280 nm

這種高吸附容量的離子交換樹脂可在高樣品負載量的情況下依然還具有高分離效率和高分辨率的特點。從圖6中可以看到，采用1.8µm粒徑的Proteomix SCX 無孔樹脂，當樣品負載量高達200µg時色譜柱對細胞色素C仍具有滿意的分離效果。

高的分辨率和高選擇性

　　Proteomix無孔樹脂具有三個特點。首先，納米厚度的親水層完全消除了PS/DVB與生物樣品之間的非特異性相互作用。其次，無孔顆粒結(jié)構(gòu)使樣品的橫向擴散達到最小并阻止了其向填料顆粒內(nèi)部的擴散。第三，賽分公司的專有技術(shù)可以合成均勻致密的離子交換層。經(jīng)過獨具匠心設(shè)計的Proteomix SCX-NP、WCX-NP、SAX-NP和WAX-NP樹脂可為蛋白質(zhì)、寡核苷酸、糖類和多肽等提供最好的分辨率和分離效率。圖7是4.6mm I.D.?50mm Proteomix SCX-NP3 (3µm)短柱對三種蛋白混合物（核糖核酸酶A、細胞色素C和溶菌酶）的分離圖譜。溶菌酶在5cm長的柱子上分離效率達到了100,000理論塔板數(shù)，這樣的分離效果是前所未有的。

圖4. Proteomix SCX-NP 柱對蛋白混合物的分離

圖5. Proteomix SCX-NP 柱(4.6 mm I.D.´50 mm, 3 µm)分離溶菌酶及其雜質(zhì)，分離條件同圖4。

獨特的Proteomix離子交換色譜柱對蛋白分離具有最高的選擇性。如上圖所示，溶菌酶的6個色譜峰在4.6 mm I.D.´50 mm Proteomix SCX-NP3 (3 µm)短柱上得到了很好的分離。如此高的選擇性遠優(yōu)于其他公司同類產(chǎn)品。

圖6. 用Proteomix SAX-NP5柱分離卵清蛋白和BSA混合物

左圖是5 µm粒徑的Proteomix SAX-NP柱對卵清蛋白和BSA混合物的分離結(jié)果。從圖中可以明顯看到卵清蛋白及其雜質(zhì)和BSA及其二聚體的分離。

粒徑對分離效果的影響

　　填料粒徑越小，分離效率越高，分離速度越快。 Proteomix離子交換樹脂的粒徑具有多種規(guī)格，粒徑從1.0 µm到10 µm不等，可用于分析和半制備等不同用途。用1.7、3、5和10 µm四不同粒徑的弱陽離子交換樹脂對三種蛋白分離得到的譜圖如圖7。從圖中可以看到，粒徑越小，分離效率和分辨率就越高。例如溶菌酶中一個標號為N的雜質(zhì)，在用10 µm粒徑的WCX柱基本不能得到分離。在用5 µm粒徑的WCX柱上則基本達到基線分離。當粒徑減小到3 µm時，可以獲得基線分離。而當粒徑進一步降低到1.7 µm時雜質(zhì)可得到完全分離。

圖7. 不同粒徑Proteomix WCX-NP 柱分離蛋白混合物

流動相: A, 20 mM PBS; B, A+1.0 M NaCl

梯度: 0-100% B (20 min)

流速: 蛋白濃度(1.0 mg/mL) (1) 核糖核酸酶A (2) 細胞色素C (3) 溶菌酶

檢測波長: UV 280 nm

高的批間重現(xiàn)性

　　賽分科技的Proteomix離子交換柱具有極高的批間重現(xiàn)性，這得益于受到嚴格監(jiān)控的聚合物樹脂生產(chǎn)及表面化學修飾工藝。不同批次間的保留時間誤差在6%以內(nèi)。圖8是對三批3 µm粒徑的Proteomix SAX-NP柱分析結(jié)果的比較。

圖8. Proteomix SAX 柱的批間重現(xiàn)性

測試條件: SAX-NP3 柱(3 µm, 4.6 mm I.D.×50 mm); 20 mM Tris, pH 8.0, 0-0.3 M NaCl (15 min)

流速: 0.5 mL/min

檢測波長: 214 nm